无菌室浮游菌测试标准操作程序

2019-08-27 11:02:54 107

1、目的

 

建立无菌室浮游菌测试标准操作程序,规范无菌室浮游菌的检测。

 

2、范围

 

适用于无菌室(包括洁净工作台)浮游菌的测试和环境验证。

 

3、职责

 

QA、QC人员遵照执行。

 

 

 

4、内容

 

4.1 参考标准:GB/T 16293-2010

 

4.2 测试方法

 

 本测试方法为计数浓度法,即通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的培养基(选择能证实其能够支持微生物生长的培养基),经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数,以判定该无菌室的微生物浓度。

 

4.3 测试仪器、辅助设备和培养基

 

浮游菌采样器、培养皿(选用与仪器相适应的培养皿)、培养基、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。

 

4.4  测试状态及测试时间

 

4.4.1 静态和动态两种状态均可进行测试,静态测试时,室内测试人员不得多于2人。

 

4.4.2 在静态a测试时,单向流无菌室(区),测试在净化空调系统正常运行时间不少于10分钟后开始;非单向流无菌室(区),测试在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。在静态b测试时,单向流无菌室(区),测试在生产操作人员撤离现场并经过10分钟自净后开始;非单向流无菌室(区),测试在生产操作人员撤离现场并经过20分钟自净后开始。

 

 

 

4.5  采样点的确定

 

4.5.1  最少采样点数目见表1,每次最小采样量见表2。

4.5.2   采样点位置布置宜力求均匀,避免采样点在局部区域过于稀疏,采样点按照《洁净区环境监控管理规程》附件×××车间洁净度监测采样点布局图的要求布置,每个采样点一般采样一次。

 

4.5.3工作区采样点位置离地0.8m~1.5m左右(略高于工作面),送风口测点位置离开送风面30cm左右,可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。

 

 

 

4.6     测试准备

 

4.6.1   采样器在进入被测区域前先清洁表面,然后用75%酒精消毒一遍或存放于被测区域内,与被测试区域一起消毒(用于A级无菌室的采样器必须预先放在被测房间内)。

 

4.6.2  A/B级区采用一次性培养皿,其它区域按无菌操作要求,在中检室洁净工作台上提前制备培养备用(将灭菌后的培养基用水浴溶解,冷却至约50-60℃,Φ90mm培养皿每个倾注约20ml培养基,Φ150mm培每个倾注约30ml培养基),培养皿加盖后在室温下放至凝固。自制好的培养皿在无菌室内存放不超过48小时,2~8℃保存的培养皿一般不超过1周,一次性培养皿在标注的有效期内使用,过期不得使用。

 

4.6.3  A/B级区使用的培养皿在区域消毒前一次性传入,随环境一起消毒,在消毒液取用间架子上暂存,在有效期内使用。若需临时传入,则必须在前臭氧消毒前通过C级与B级传递窗传入B级区进行臭氧消毒,第二天使用。传入前表面也必须用75%酒精擦拭。其它区域用培养皿按物品传入要求当天传入使用。

 

4.6.4  采样前,先用75%酒精清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面(FKC型浮游空气尘菌采样器用酒精清洗采样头)。

 

4.6.5  测试具体操作见“JYQ-Ⅱ型浮游菌采样器标准操作程序或FKC-1型浮游空气尘菌采样器标准操作程序”。

 

4.6.6  采样结束后,盖上培养皿盖子,在培养皿上标注所有信息(包括产品批号,放置位置等),将培养皿用适宜的方式捆扎,倒置于30~35℃恒温培养箱中培养,培养时间不少于2天。

 

4.6.7  培养结束后逐个检查培养皿,用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

 

 

 

4.7   测试记录应包含以下内容

 

4.7.1   被测试区域名称、测试日期、测试依据、测试者姓名、测试仪器及测试方法的描述,测试时所采用的状态和室内测试人员数,采样点数目,测试次数、采样流量,测试结果(包括所有统计计算资料)等。

 

4.7.2  若为动态测试,还应记录现场操作人员数量,现场设备运转情况等。

 

4.8   结果计算

 

4.8.1  用计数方法得出各个培养皿的菌落数。

 

4.8.2  每个测点的浮游菌平均浓度计算按下式进行

 

 

 

4.9   结果评定

 

4.9.1  每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定评定标准中的界限。

 

4.9.2  在静态测试时,若某测点的浮游菌平均菌浓度超过评定标准,则应重新采样两次,两次测试结果均合格才能判为符合。

 

4.9.3  若有超过规定者,必须及时与生产部门联系,对该区域进行消毒或其它处理,然后重新测试至合格。

 

 

 

4.10    日常监控

 

4.10.1  浮游菌日常监控设纠偏限度和警戒限度(限度范围及取样频次见《洁净区环境监控管理规程》),以保证无菌室(区)的微生物浓度受到控制,定期检测以检查微生物负荷以及消毒剂的效力,并作倾向分析。静态和动态的监控都可以采用该方法。

 

4.10.2  对于浮游菌的取样频次,如果出现下列情况应考虑修改,在评估以下情况后,也应确定其他项目的检测频次

 

——连续超过纠偏限度和警戒限度;

 

——停工时间比预计延长;

 

——关键区域内发现有污染存在;

 

——在生产期间,空气净化系统进行任何重大的维修;

 

——日常操作记录反映出倾向性的数据;

 

——消毒规程的改变;

 

——引起生物污染的事故等;

 

——当生产设备有重大维修或增加设备时;

 

——当无菌室(区)结构或区域分布有重大变动时。